Skip to main content

GENOMİK ve PROTEOMİK

 

GENOMİK ise farklı türlere ait genomların tüm yapısal ve işlevsel yönlerini inceleyen bilim dalıdır.

PROTEOMİK, genomikten türeyen bir daldır ve hücrede belirli bir zamanda belirli şartlar altında bulunan proteinlerin çalışılmasıdır.

GENOMİĞİN AMAÇLARI

• Organizmaların genomik dizilerinin derlenmesi

• Bir genomdaki tüm genlerin yerleşimlerinin belirlenmesi

• Bir genomdaki gen setinin annotasyonu (anlamının  saptanması; yorumlanması)

• Bir genomdaki tüm genlerin işlevlerinin belirlenmesi

• Farklılaşma koşulları altında hücrelerin gen ifade profillerinin belirlenmesi

• Belirli bir genomda üretilen tüm proteinlerin tanımlanması

• Evrimsel akrabalığın belirlenmesi için organizmalar arasında  gen ve proteinlerin karşılaştırılması

-Yapısal genomik, genomik dizi bilgisinin oluşturulmasını, gen keşfini, genlerin haritalarının oluşturulmasını ve yerleşimlerini içermektedir.

- İşlevsel genomik, genlerin biyolojik işlevlerini, onların düzenlenmelerini ve ürünlerini çalışır.

- Karşılaştırılmalı genomik ise, işlevsel ve evrimsel akrabalığı aydınlatmak için farklı genomların gen yada protein dizilerini karşılaştırır.

Genomik Yöntemleri

1.      Klon-klon yöntemi

2.      Shotgun (Rastgele Atış) Yöntemi

Genom projeleri büyük miktarda DNA bilgisi üretirler. Bu veriler ancak, analiz edilip yorumlandığında fayda sağlamaktadır. Bu analizlerin amaçlarından bazıları;

1. Dizinin tam ve yanlışsız olduğundan emin olmak,

2. Açık okuma çerçevelerini (ORF) bularak genleri tanımlamak,

3. Promotor bölgelerini, transkripsiyon başlama bölgelerini ve translasyon başlama bölgelerini bularak genin kimliğini doğrulamak,

4. Ökaryotik genomlarda sıplays bölgelerini, intronları ve ekzonları bulmak,

5. DNA dizisini protein dizisine çevirmek ve tüm olası okuma çerçevelerini araştırmak,

6. Bilinen protein dizileri ile DNA dizilerinin karşılaştırılmasını yaparak geni doğrulamaktır.

Dizinin Derlenmesi

Bir genomun nükleotid dizisinin tam ve hatasız olduğundan emin olmak için genomun dizisi bir defadan daha fazla belirlenir. Bu süreç derleme (compiling) olarak bilinmektedir.

Dizinin Anlamının Saptanması (Annotasyonu)

Annotasyon protein kodlamayan genleri de tanımlar ve genomda bulunabilecek tekrarlayan dizi ailelerini ve hareketli genetik elementleri de saptar ve karakterize eder.

Protein kodlayan genlerin yerleşiminin bulunması bilgisayar yazılımı kullanılarak dizinin analiz edilmesi ile gerçekleştirilir.

Genleri kodlayan diziler birçok tanımlayıcı özelliğe sahiptir. Protein kodlayan genler, bir proteinin amino asit dizisine çevrilebilecek nükleotid üçlülerini (triplet) içeren açık okuma çerçevelerinden (ORF,open reading frame) oluşur.

ORF’ler bir başlama dizisi ile (ATG) başlar ve sonlanma dizisi ile biter (TTA, TAG ve TGA).

ORF araştırmalarında, dizisi çıkarılmış zincir ve komplementeri olan zincir incelenerek hangi zincirin protein kodlayan gen olduğu belirlenmelidir.

Genlerin başındaki kontrol bölgeleri bir TATA dizisi ile belirlenmektedir.

Eğer bir DNA dizisi bir protein kodluyorsa, dizi bir açık okuma çerçevesine sahiptir.

Kodon eğilimi, birkaç farklı kodon tarafından belirlenebilen aminoasitleri kodlamak için bir yada iki kodonun seçici olarak kullanılmasıdır.

Genlerin İşlevlerinin Belirlenmesi

Genomik bir dizinin annotasyonundan sonra yapılması gereken iş, dizide bulunan tüm genlerin işlevlerini belirlemektir.

Genlerin bazılarının işlevleri, klasik mutaganez ve bağlantı haritalaması yöntemleri ile belirlenmiştir, ama diğer birçok genin kesin işlevleri henüz belirlenememiştir.

Bu genlerin işlevlerinin belirlenmesindeki bir yaklaşım homoloji araştırmalarının kullanılmasıdır. Bu analizin birçok bileşeni vardır:

Diğer organizmalardan elde edilen benzer genleri bulmak için Gen Bankası gibi veri tabanlarının araştırılması.

ORF dizisinin, diğer bir organizmadaki iyi karakterize edilmiş gen dizisi ile karşılaştırılması.

İyon kanalları, DNA-bağlanma bölgeleri ya da salgılama/taşıma sinyalleri gibi protein domainleri kodlayan DNA bölgeleri gibi işlevsel motifler bakımından ORF’lerin tanınması.

İşlevsel genomikte kullanılan seviyeler bir organizmanın yaşamasında ve üremesinde genin önemini yansıtmamaktadır. Sadece genin işlevi hakkında bilgilerimizi temel alan bir adlandırmadır.

Plazmitler bakteri için zorunlu olmayan genleri taşıdıkları, bir hücreden diğerine aktarılabildikleri ve aynı plazmit sıklıkla farklı bakteri türlerinde bulunduğu için, bakteri genomunun bir parçası olarak kabul edilmezler.

Öbakteri kromozomlarında protein kodlayan genler hakkında iki genelleme yapabiliriz: İlki, gen yoğunluğu çok yüksektir.

Aquifex aeolicus’ta bir operon altı gen içerir.


Archaea Genomları

Bu organizmanın genlerinin çoğu (%58’i), bilinen diğer genlerle uygunluk göstermez, ama enerji üretimine, hücre bölünmesine ve genel metabolizma olaylarına katılan genlerinin büyük bir kısmı Eubacteria’dakilere benzer.

Gen organizasyonuda Eubacteria’ya benzemektedir; genler sıkıca paketlenmiştir, operonları vardır ve intronları yoktur.

RNA sentezine, protein sentezine ve DNA sentezine katılan genleri ökaryotunkilere benzer.

En şaşırtıcı olan ise, kromozomal histon proteinlerinin olması ve kromozomal DNA’sının kromatin yapısı şeklinde düzenlenmiş olmasıdır.

Protein kodlayan genlerinde intronlar olmamasına rağmen Archaea, tRNA genleri arasında ökaryotlarda olduğu gibi intronlar içerir.

Ökaryotik Genomların Genel Özellikleri

Tekrarlayan Diziler: İntronların ve tekrarlayan dizilerin varlığı ökaryotlardaki genom boyutundaki büyük farklılığın iki ana nedenidir.

Karşılaştırmalı Genomik

Karşılaştırmalı Genomik, Bir organizmanın genetik bilgisinin diğerininkiyle karşılaştırılmasıdır.

-gen bulma,

-insan hastalıkları için model organizma geliştirme, genler, genomlar, türler arasındaki ilişkilerin evrimsel gelişiminin aydınlatılması ve

-organizmalar ve çevreleri arasındaki ilişkilerin çalışılması gibi birçok araştırma alanı ve pratik uygulamaları olan bir daldır.

Karşılaştırılmalı genomik, nükleik asit ve amino asit dizilerini içeren veri tabanlarının oluşturulmasını, kullanılmasını, floresan in situ hibridizasyonu (FISH) gibi gen haritalamanın sitogenetik tekniklerini ve mutagenez gibi deneysel yöntemleri içeren çok çeşitli kaynak ve teknikleri kullanmaktadır. Karşılaştırılmalı genomik bu kaynakları, organizmalar arasındaki benzerlik ve farklılıkları belirlemek, bu farklılıkların nasıl fenotip, hayat döngüsü ve diğer özellikleri etkilediğini saptamak ve bu genetik farklılıkların evrimsel geçmişini ortaya çıkarmak için kullanmaktadır.

Nükleer reseptörler (NR’ler), steroid hormonlara cevap olarak hedef gen kümesinin transkripsiyonunu düzenleyen transkripsiyon faktörleri süper ailesidir. Yaygın olarak kullanılan ilaçların %10’undan fazlası NR’lere bağlanarak çalışır.

Ortologlar, farklı türlerde aynı göreve sahip olan ve ortak atasal genden türeyen genlerdir.

 

Popular posts from this blog

FARMAKOGENOMIK

¨ Farmakogenomik terimi, belirli aday genlerde bulunan dizi varyasyonunun, bireylerin ilaca karşı cevabını nasıl etkilediğini inceleyen farmakogenetik ile değiştirilerek kullanılabilir. Kişiye özel tedavi; her bir hastaya özel ilaç oluşturulması yerine; kişilerin belli bir hastalığa duyarlılığı ya da spesifik tedaviye yanıtlarına göre küçük populasyonlara ayrılıp bu populasyonlara özel ilaç oluşturulmasıdır . FDA-onaylı ilaçların %10’u farmakogenomik bilgileri içeren etiket bulundurmaktadır. Kişisel Tıp ve Hatalık Tanısı ¨ Tanı Testleri ¤ Semptomatik hastalarda, şüpheli genetik bozukluğa bağlı gen varyasyonlarının var yok analizleri ¨ Tahmini Testleri ¤ Bilinen hastalığı içeren aile öyküsü bulunan hastalarda gen mutasyon saptanması (Huntingon Hastalığı veya BRCA bağlı meme kanseri) ¨ Taşıyıcı Testleri ¤ Yavrulara geçebilen, hastalığa neden olan mutasyonları taşıyan hastaların belirlenmesine yardımcı olur (Tay-Sachs ve kistik fibrozis) ¨ Prenatal Testler ¤ Fetusta...

MUTATIONS AND DNA REPAIR MECHANISIMS

Types Of Mutations • Spontaneous mutations: occur because of natural processes in cells, for example DNA replication errors. • Induced mutations: occur because of interaction of DNA with an outside agent or mutagen that causes DNA damage. the importance of mutations  genetic variation  deleterious or advantageous  mutations in germ cells can lead to heritable genetic disorders. mutations in somatic cells may lead to acquired diseases such as cancer or neurodegenerative disorders.  tools for molecular biologists in characterizing the genes.  • Mutations that alter a single nucleotide pair are called point mutations.  Other Kinds of Mutations  expansions of trinucleotide repeats,  extensive insertions and deletions major chromosomal rearrangements • Transition mutations replace one pyrimidine base with another, or one purine base with another.  • Transversion mutations replace a pyrimidine with a purine or vice versa. Sickle cell anemia mutatio...

CONVENTIONAL METHODS IN MOLECULAR BIOLOGY

  Comparison of conventional and modern techniques  • In conventional techniques, isolation and manipulation of DNA or RNA is not applied.  • Experiments are set based on phenotypic characters and the results are expressed based on observations or quantitative measurements.  • The basic materials of modern biotechnology are nucleic acids (NA) and proteins (P).  • NA and P are isolated from tissue, purified and subjected to certain processes.  • NAs are amplified in bacteria or by polymerase chain reaction (PCR), cut with restriction enzymes and hybridized with a different NA, If necessary, or run on an Agarose Gel Electrophoresis, stained and visualized.  • Likewise, proteins are purified, run on an SDS-PAGE gel, stained/immunoblotted and visualized.  Proof of transforming factor   In vivo Experiment  • In 1928, Frederick Griffith described a transforming principle that transmitted the ability of bacteria to cause pneumonia in mice. “tra...